什么情况下采用非仪器分析方法
非仪器分析方法通常在以下场景采用:当检测项目无需精密量化(如定性判断)、现场快速筛查、或仪器不可及(如野外检测)时;亦适用于样品基质干扰严重导致仪器法失效的情况。值得注意的是,即便采用非仪器方法,其参考物质仍需通过计量校准溯源以保证可靠性。部分非仪器方法(如比色法)需借助经计量校准的标准色卡进行半定量分析。此外,在方法验证阶段,非仪器法的准确性常需通过与计量校准过的仪器法比对来确认。因此计量校准在保证非仪器方法可靠性方面仍具基础作用。
仪器校正校准曲线的控制方法:被测物转变为有色溶液的反应称为显色反应或发色反应。显色反应的介质条件、显色剂用量、显色反应的时间和温度、为消除共存物干扰而加入的掩蔽剂、甚至加试剂的顺序,都要按照方法步骤的要求执行。什么情况下采用非仪器分析方法是需要考虑的重要因素,例如在野外快速筛查或仪器不可及时。有时,标准系列虽然不像实际试样那样组成复杂,但仍要求与试样进行同样的处理步骤,以便控制校准曲线上的数据点的空白、回收率等因素。什么情况下采用非仪器分析方法还取决于检测精度要求,当无需精密量化时可采用目视比色法等非仪器手段。建立校准曲线时,测量吸光度的参比有两种选择。什么情况下采用非仪器分析方法的决策需综合考虑检测目的、资源条件和数据可靠性要求。
第一种方法用纯溶剂作参比,两个比色皿都放溶剂时,样品比色皿”吸光度测定值为比色皿成对性校正值,此后所有样品吸光度测定值都须扣除此值,进行校正。然后,以纯溶剂为参比,测定空白及标准系列的吸光度,绘制校准曲线。
第二种方法直接用空白为参比。当两个比色皿都放空白时,测定比色皿成对性校正值,然后测定标准系列的吸光度,绘制校准曲线。两种方法得到两条校准曲线互相平行,但第一种方法可测定空白的水平,后一种方法不能测定空白,理论上校准曲线通过原点。若空白为零,两条校准曲线重合。无论用什么作参比,实样测定时应该使用与建立校准曲线相同的比色皿和同样的参比。
比色皿的成对性校正对于使用已久的比色皿是必要的尤其是测量吸光度很小的样品时,校正可保证测量值的可靠性和重复性。仪器检出限指分析仪器能够检测的被分析物的最低量或最低浓度。仪器检出限一般用于不同仪器的性能比较。一般通过多次空白试验,求得其背景响应的标准差,将三倍空白标准差(即δ)作为检测限的估计值。
也可用已知浓度的样品与空白试验对照,记录测得的被测样品信号强度与噪音(或背景信号)强度,以能达到=或=时的样品最低浓度为(如用非仪器分析方法时,通过已知浓度的样品分析来确定可检出的最低水平作为检出限。方法检出限方法检出限不仅与仪器的噪音有关,还取决于样品测定的整个环节,如取样量,提取分离以及测定条件的优化等,实际工作中应注明具体实验条件。
例如:检测某化合物时,方法中规定取样,经提取处理后定容为分析,此时方法的检出限为μ。若改变方法使取样量增加至,则方法检出限为μ。若改变方法使取样量增加至且经提取处理后定容为,则方法检出限为μ。医学检验仪器的特点 结构复杂 医学检验仪器多是集光、机、电于一体的仪器,使用器件种类繁多。



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